Implicaciones de la expresión de pd-l1 en carcinomas orales de células escamosas

Resumen

El Carcinoma Oral de Células Escamosas (COCE) es una enfermedad que afecta globalmente a más de 355,000 personas con una mortalidad aproximada del 50% por la enfermedad. Existe la necesidad de predecir qué casos van a evolucionar negativamente, con un mejor pronóstico para los pacientes y planificación terapéutica. Programmed Death-Ligand 1 (PD-L1) es una proteína de la membrana celular que puede inactivar la respuesta inmunitaria, habiéndose comunicado su sobreexpresión en tumores, incluyendo COCE, y que ha sido sugerida como un biomarcador pronóstico potencial. Esta tesis va a intentar responder a tres preguntas: 1) ¿Qué proporción de COCEs son positivos para PD-L1? 2) ¿Cuáles son las consecuencias de la expresión de PD-L1 sobre el pronóstico del COCE? 3) ¿Qué asociaciones existen entre factores clinico-patológicos y la expresión de PD-L1 en COCE? Métodos Hemos empezado con una revisión sistemática con meta-análisis de la literatura sobre PD-L1 y COCE, seleccionando todos los estudios con mediciones inmunohistoquímicas de PD-L1. Se extrajeron Odds ratios y hazard ratios de los estudios para buscar correlaciones con factores clinico-patológicas de interés. Hemos usado un modelo de efectos aleatorios para combinar los factores de interés. Hemos usado un meta-análisis de proporciones para determinar la proporción de COCES PD-L1 positivos. Posterior al meta-análisis hemos realizado un estudio retrospectivo observacional de tumores de COCEs archivados. Un total de 55 tumores han sido analizados para PD-L1 mediante técnica inmunohistoquímica. Se correlacionó la expresión de PD-L1 con las variables clinico-patológicas investigadas. Hemos investigado mediante curvas de Kaplan-Meier y modelos de proportional hazards de Cox los factores de riesgos de recurrencia de la enfermedad. Principales Hallazgos La proporción de tumores positivos El meta-análisis ha demostrado una distribución de tumores positivos de 7%-87% (intervalo de confianza de 1%-98%). La gran distribución se debe a distintos métodos de medir la expresión de PD-L1, específicamente: si PD-L1 fue medido en el citoplasma o en la membrana, qué porcentaje de células tumorales PD-L1 positivo fue necesario para considerar un caso PD-L1 positivo (el punto de corte), si la intensidad de la tinción inmunohistoquímica fue considerada, y finalmente qué anticuerpo fue usado para la técnica IHQ. Hemos concluido que se necesita un sistema estandarizado y damos las siguientes recomendaciones para futuro estudios: medir la expresión de PD-L1 exclusivamente en la membrana, usar un punto de corte de 5%, considerar una tinción a cualquier intensidad como positivo, y usar anticuerpos de kits validados por la FDA (Food and Drug Administration). El efecto de PD-L1 sobre el pronóstico El meta-análisis ha demostrado un peor pronóstico para COCE PD-L1 positivo cuando se mide la expresión de PD-L1 en la membrana. Los resultados fueron significados para supervivencia libre de enfermedad (DFS), supervivencia específica de la enfermedad (DSS) y supervivencia general (OS) pero en este último caso solo después de quitar los pequeños estudios (<25 casos). Estos hallazgos derivan de solo 4 o 5 estudios y no fueron robustos en los análisis de sensibilidad. Nuestro estudio IHQ también demostró un peor pronóstico para COCE con PD-L1 en la membrana, pero no logró obtener significación estadística. Los datos parecen indicar un peor pronostico para COCE PD-L1 positivo, pero se necesitan más estudios con mayor tamaño muestral para su confirmación. La relación entre la expresión de PD-L1 y variables clinico-patológicos En nuestro meta-análisis y en el estudio de IHQ hemos demostrado que los COCEs PD-L1 positivos fueron más comunes en no-fumadores y no-bebedores. El meta-análisis también ha demostrado que las mujeres con COCE con mayor probabilidad presentaron tumores PD-L1 positivos, pero este hallazgo no fue significativo en nuestro estudio IHQ. Estos resultados son importantes porque representan una población no típica en el desarrollo de COCE. La ventaja de la evasión inmunitaria que confiere PD-L1 puede ser un factor en el desarrollo de COCE en esta población de pacientes. Nuestro estudio IHQ ha demostrado un aumento en el número de linfocitos infiltrantes en el microambiente tumoral de COCEs PD-L1 positivos. Este resultado demuestra que el microambiente tumoral no es libre de células inmunitarias y da soporte a la teoría de que las células inmunitarias provocan la expresión de PD-L1 vía citoquinas inflamatorias. También hemos encontrado un aumento de PD-L1 en el epitelio no tumoral adyacente al punto de invasión. Este resultado sugiere que PD-L1 puede expresarse en lesiones precancerosas y puede actuar como un factor oncogénico. Conclusiones La investigación presentada en esta tesis mejora nuestro conocimiento sobre PD-L1 en COCE. Hemos comunicado inconsistencias en los métodos de medición de PD-L1 y hemos hecho recomendaciones para mejorar el diseño de futuro estudios. Hemos identificado a PD-L1 como un potencial marcador de mal pronóstico. Hemos identificado tres grupos no típicos de COCE: mujeres, no-bebedores y no-fumadores. Estos subconjuntos de pacientes pueden tener una enfermedad que actúa de un modo diferente a los COCEs de fumadores y bebedores, por ejemplo, evadiéndose de la repuesta inmunitaria por la vía PD-L1. Este hallazgo podría mejorar una adaptación del tratamiento para estos pacientes. Finalmente, hemos encontrado expresión de PD-L1 en el epitelio adyacente al tumor, y este hallazgo demuestra una necesidad de estudiar PD-L1 en COCE precoz y lesiones precancerosas.