Cromosomas sexuales gigantes de Microtus cabreraeanálisis molecular de su composición, estructura y evolución

Résumé

Introducción La determinación del sexo en la especie Microtus cabrerae presenta unas características que hacen de ella un interesante modelo para estudiar la estructura, composición y evolución de los cromosomas sexuales y los mecanismos de determinación del sexo en mamíferos. Los cromosomas X e Y de esta especie son especialmente grandes debido a la presencia de grandes bloque de heterocromatina constitutiva. Los cromosomas sexuales de M. cabrerae no aparean durante la profase I de la meiosis, siendo por tanto asinápticos. El gen determinante de testículo SRY tiene en esta especie una distribución única dado que se localiza en el cromosoma Y, como es normal en la mayoría de los mamíferos, y en el cromosoma X, estando presente en las hembras siendo M. cabrerae la única especie en la que esto ha sido descrito. Objetivos Hemos estudiado la composición y organización de los cromosomas sexuales gigantes de M. cabrerae mediante técnicas citogenética y moleculares. Los objetivos propuestos son los siguientes: 1. Estudiar secuencias repetidas de los bloques heterocromáticos de los cromosomas X e Y en M. cabrerae. 2. Analizar el origen y la evolución de los cromosomas sexuales gigantes in especies de Microtus. 3. Estudiar la localización cromosómica, la organización, la secuencia y el origen de las copias múltiples del gen SRY presentes en machos y hembras de la especie M. cabrerae. Métodos Para realizar este trabajo hemos empleado técnicas citogenéticas (preparaciones cromosómicas, bandas C, FISH y "chromosome painting") y moleculares (extracción de ADN genómico y plasmídico, aislamiento de ADN repetido mediante restricciones, amplificaciones por PCR, clonado y secuenciación de ADN, marcaje de sondas y Southern blot). Resultados y Discusión 1. Secuencias repetidas de los cromosomas sexuales de M. cabrerae Hemos caracterizado tres tipos de secuencias repetidas de estos cromosomas: MS