Papel de Pitx2 en la regulación transcripcional y post-transcripcional de la miogénesis

Resum

La medicina regenerativa se ha enfocado durante la última década en el aislamiento y crecimiento de una amplia variedad de tejidos con la intención de restaurar la función del órgano dañado. El desarrollo de tales estrategias es una demanda social. Varios órganos, tales como la musculatura esquelética, pueden ser reconstruidos de forma natural, sin embargo, bajo determinadas condiciones fisiopatológicas, esto no llega a ocurrir. A día de hoy tenemos evidencias de que una pequeña subpoblación de mioblastos son capaces de reprogramarse para proliferar y convertirse en células musculares diferenciadas. Sin embargo el número de células que pueden llevar a cabo esto es un número muy reducido para poder llevar a cabo una curación extensa. Dentro de este proyecto se ha desarrollado una estrategia que permita solventar este problema. Transfectando el factor de transcripción Pitx2 en mioblastos tempranos, se promovería una alta proliferación, mientras de inhibiría la completa diferenciación a miotubos adultos, por lo que se establecería un marco para usar tales protocolos en técnica terapéuticas de recuperación de tejidos dañados. Con este trabajo se pretende investigar la hipótesis de que Pitx2 juega un papel preponderante, frente a Pitx3, en las vías moleculares que modulan las distintas fases miogénicas durante el desarrollo, así como evaluar el papel que juegan Pitx2 y Pitx3 en las células progenitoras de la musculatura esquelética en el adulto (células satélite). Para este propósito se lleva a cabo una combinación de estudios en vitro e in vivo para: 1) determinar: las funciones específicas de las distintas isoformas de Pitx2 y Pitx3 durante la miogénesis analizando la modulación que puedan estar ejerciendo otras isoformas de Pitx2 y Pitx3 sobre los genes que regulan el ciclo celular así como sobre factores de transcripción específico de músculo. Para ello las que se ha "silenciado" las diferentes isoformas de Pitx2 mediante RNA interferencia; así mismo evaluaremos in vivo anomalías fenotípicas en mutantes para Pitx2c y Pitx2ab. 2) Analizar las interacciones transcripcionales en vivo entre Pitx2 y Pax3/Pax7 durante miogénesis esquelética. Para ello analizaremos la formación del músculo esquelético en los ratones Pax3Cre-Pitx2loxP. 3) Estudiar si el papel de Pitx2 en el equilibrio proliferación/diferenciación en células satélites aisladas puede aumentar la capacidad regenerativa de éstas células.